环状RNA：新的生物标记物

        2013年，发现细胞囊泡运输调节机制的科学家们，荣获了当年诺贝尔生理学或医学奖。作为人体内一类重要囊泡，外泌体（exosomes）已成为科研热点。环状RNA是最新发现的一类广泛存在的非编码RNA类型，其抗RNA外切酶的能力尤为突出。大量证据表明核酸和蛋白质分子存在于外泌体中，受外泌体介导在细胞间进行传递。但是环状RNA与外泌体之间的联系尚处于空白。最新的Cell research报道了复旦大学肿瘤研究所黄胜林及何祥火课题组首次发现了exosomes内含有大量circRNA。

研究人员收集了MHCC-LM3肝癌细胞培养上清中的exosomes，利用高通量测序（RNA-seq）分别检测细胞和exosomes中的环状RNA，通过SRPBM (spliced reads per billion mapping)计算环状RNA特异性回切位点，数据分析结果显示癌细胞和exosomes中分别含有5,484和6,751个circRNAs。

A：Circos 图示细胞和exosomes中的circRNA 

大量文献表明miRNA在exosomes富集，研究人员进一步对exosomes中的circRNA与miRNA之间的关系进行探索。明星环状RNA——CDR1as 可以作为miR-7海绵发挥作用，研究人员转染miR-7 mimics并检测CDR1as在细胞和exosomes中的丰度。结果显示miR-7显著下调exosomes中CDR1as的丰度，但在细胞中作用不显著，表明exosomes对circRNA有一定的分选功能。

 miR-7过表达对细胞和exosomes中的CDR1as水平改变的检测

血清中含有大量exosomes，研究人员对人血清exosomes进行RNA-seq检测，结果发现，血清来源的exosomes中含有1,215个circRNAs，其中90%以上的circRNA含有外显子序列。

 
血清来源的exosomes中circRNA检测

    肿瘤和正常血清来源的exosomes中circRNAs是否有差异成为一个非常有趣的课题。研究人员随后将人肝癌细胞MHCC-LM3移植到小鼠模型，分别检测肿瘤移植小鼠和对照小鼠血清来源的exosomes，qPCR结果显示circ-CDYL在肿瘤移植小鼠中的表达水平显著高于对照小鼠。进一步，研究人员对结肠癌患者和正常人血清exosomes中的circRNA进行检测，结果显示circ-KLHDC10在结肠癌患者exosomes中的表达水平显著高于正常人，表明外泌体来源的circRNA可以作为理想的癌症诊断生物标记物。

A.肿瘤移植小鼠和对照小鼠血清来源exosomes中circ-CDYL表达水平检测。 

B. 结肠癌患者和正常人血清来源exosomes中circ-KLHDC10表达水平检测。

原文：Li Y, Zheng Q, Bao C, et al,.Circular RNA is enriched andstable in exosomes: a promising biomarker for cancer diagnosis.Cell Res.2015 Aug;25(8):981-4. 

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